Увод
Метода индиректног бројања назива се и метода бројања живих бактерија. Његов принцип је да свака жива бактерија може да расте и формира колонију под одговарајућим медијумом и добрим условима раста. Разблажите узорак који се тестира серијом 10-струких разблажења, а затим изаберите три разблажења раствора бактерија, односно узмите 0,2 мл у стерилну плочу, затим сипајте одговарајућу количину растопљеног и охлађеног на око 45 ℃ медијума, и бактерије Након што се течност измеша, охлади и очврсне, ставите је у инкубатор или стакленик на одговарајућу температуру за култивацију и пребројите бактерије након што су порасле.
Примери
Број живих ћелија по милилитру оригиналног бактеријског раствора = више од три плоче које се понављају на истом нивоу разблажења
просечан број колонија × фактор разблажења × 5
Овом методом се такође може узети 0,2мл разблаженог бактеријског раствора и додати у припремљену плочу, а затим стерилним распршивачем распоредити бактеријски раствор по целој површини плоче, ставити на одговарајућу температуру за култивацију и израчунати број колонија, а затим израчунајте укупан број живих бактерија по милилитру оригиналне бактеријске течности према горњој формули.
Метод
Ова метода може да изазове загађење услед нестручног рада, или да изазове нестабилне резултате услед превисоке температуре медија и оштећења ћелија. Ипак, пошто ова метода може да измери број микроба у узорку, она је и даље ефикасан метод за мерење броја бактерија који се обично користи у настави, научним истраживањима и производњи. Количина бактерија, квасца, пупољака и спора садржаних у земљишту, води, млеку, храни и другим материјалима може се одредити овом методом. Али није погодан за мерење филаментозних микроорганизама у узорцима, као што су актиномицете или филаментозне гљиве или филаментозне цијанобактерије и друга вегетативна тела.
Поред горње две најчешће коришћене методе бројања, постоје метода мембранске филтрације и турбидиметријска метода. Метода мембранске филтрације је пропуштање одређене запремине језерске, морске воде или воде за пиће кроз мембрански филтер када је број бактерија у узорку веома мали. Затим се филтерска мембрана осуши, боји и обрађује да би мембрана постала провидна, а затим се под микроскопом израчунава број бактерија на мембрани (или у одређеном подручју); принцип турбидиметрије је да је концентрација ћелија у суспензији бактерија у одређеном опсегу. Замућеност је директно пропорционална оптичкој густини. Што је више бактерија, већа је оптичка густина. Због тога се уз помоћ спектрофотометра на одређеној таласној дужини може мерити оптичка густина суспензије бактерија, а оптичка густина (О.Д.) се користи за изражавање количине бактерија. Експериментално мерење се мора контролисати унутар линеарног опсега где је концентрација бактерија пропорционална оптичкој густини, иначе ће бити нетачна. Метода бројања микроба се брзо развија, а постоје различите методе као што су брзи, једноставни и аутоматизовани инструменти и уређаји.
Уопштено, укључује методу бројања плоча за разблаживање, методу бројања течности за разблаживање и методу бројања танког филма.