Epiteelisolujen

Luokittelu

Epithelialtissueisdividedintocoveringepithelium,glandularepithelium,sensoryepithelium,reproductiveepithelium,myoepithelial,etc.Theepitheliumusuallyreferstothecoveringepithelium.

Epithelialcellscanbedividedintotwotypesaccordingtothenumberofcelllayers,monolayerandmulti-layer,andcolumnarandsquamousaccordingtotheirshape.

Pylväsrepiteelisolut: jakautuvat pääasiassa nenäonteloon, nenänieluun, elimiin, keuhkoihin, vatsaan, suoleen, kohdunkaulaan, kohdun limakalvoon ja munanjohtimiin.

Levyepiteelisolut: peittävät koko ihon, suun, kurkun, nenänielun osan, ruokatorven, koko emättimen ja kohdunkaula. Levyepiteelisolut on jaettu tyvisoluiksi, keskisoluiksi ja pintasoluiksi.

Rooli

Theepithelialcellsintheouterlayeroftheskinaregenerallykeratinized,whichcanprotectandabsorb.

Theepithelialcellsinthecavityarehighlydifferentiatedandhavethefunctionsofsecretion,excretionandabsorption.

Theepithelialcellsonthesurfaceofdigestiveorgans,lungsandotherorgansplayanimportantroleindigestion,absorption,andexchangeofoxygen.

Viljely

1) Epidermaalinen soluviljely

1.Materials:Takesmallpiecesofsurgicalskingraftsorsurgicalresidualskin,preferablywiththinkeratinizationlayer,andbetterskinforprematureabortioninfants,cutintosmallpiecesof0.5to1squarecentimeters.

2.EDTA-hoito: Ensin 0,02 %EDTAhuoneenlämpötila 5 minuuttia.

3. Kylmäsulatus: Vaihda 0,25 % trypsiin ja aseta 4 °C:seen yön yli.

4.Separation:Takeouttheskinandseparatetheepidermisfromthedermiswithvascularforcepsortweezers.

5.Lämminsulatus:Ota orvaskesi pois ja käsittele sitä erikseen,leikkaa pienemmiksi paloiksi saksilla,putitinaa uutta 0,25% trypsiiniä ja lopuksi ruoansulatus37°C 30-60 minuutin ajan.

6.Useapipettetogentlypipetterepeatedlytomakeacellsuspension.

7.Culturesolution:Afterfilteringthrough80meshstainlesssteelgauze,centrifugeatlowspeed,suckthesupernatant,directlyaddEaglesolutionand20%calfserumtomakecellsuspension,inoculateitintodishes,andcultureinCO2incubator.

2)Rintakudoskulttuuri

Directculturemethod:(suitableforculturingsofttissuewithlessfiber)

1.InacontainercontainingasmallamountofculturesolutionorHankssolution,useasharpbladetorepeatedlycutthetissueintopieces.

2.Pourthetissuefragmentsandliquidintothecentrifugetube,addalittleculturemedium,pipetteforawhilewithapipette,andplacethetesttuberackfor3to5minutes.Aspiratetheupperlayeroffluidtoexcludethenon-breastcellpart.Repeat2to3times.

3.Afterthelasttreatment,addculturesolutiontothesedimentationtubeandpipettealittlewithapipettetoresuspendthesediment.Withoutwaitingforthecellmasstodrop,filteritintoanothertubethrough3to4layersofsterilegauze.

4.Adjusttheappropriatedensityandinoculateitintoacultureflaskforcultivation.

Collagenasedigestionmethod:(suitableforprocessinghardtissueswithmorefibers)

Prosessi on sama kuin muiden kudosten viljely.

3) Mahalaukun epiteelisolujen viljely

1.Collection:Takeasmallamountofmucosainthedistalnon-lesionareaof​​gastricspecimensfromgastriculcerorgastriccancer.

2.Puhdistus:Huuhtelun jälkeen liuoksella, joka sisältää gentamysiiniä (400 μg/ml) ja amfoterisiiniä (2 μg/mlHanks), irrota alalimakalvo tylsällä työkalulla ja leikkaa 1 mm3:n kokoisiksi.

3. Ruoansulatus: Ikollageeni- ja hyaluronidityyppinen ruoansulatus37°C 80 minuutin ajan.

4.Centrifugation:CollectthecellsuspensionandrinsetwicewithHankssolutionafter800rpm/centrifugation.

5.Inoculation:Afterthelastcentrifugation,addacompletemediumcontaining1%to2%fetalbovineserumandinoculateitintoacultureplatewithdifferentnumbersofwells.Theamountofinoculationdependsonthepurposeoftheexperiment.

4) Maksasoluviljely

Firstgenerationtissueblockculture:Takefreshliver,firststripoffthefibrouscomponentssuchascapsuleandbloodvessels,andcuttheliverinto1mmwithaknifeorscissors³Thesmallpiecesontheleftandrightsidesarecultivatedonthewall.

5) Endoteelisoluviljely

1.Takethefreshumbilicalcordafterdelivery.Ifnotcultivatedimmediately,itcanbestoredat4°C,butitshouldnotexceed12hours.Cutasectionof10-15cmlongaseptically.Otherlargebloodvessels,suchasembryosandlarvae,canalsobeusedforculture.

2.First,useathree-waysyringetoabsorbthewarmPBSsolutionandinjectitintotheveinoftheumbilicalcordtowashawaytheresidualblood.Theinjectionportshouldbeligatedwithastringtopreventliquidreflux.

3.Clamponeendoftheumbilicalcordwithavascularclamp,andslowlyinjectcollagenasewithafinalconcentrationof0.1%intotheumbilicalveinfromtheotherend.Afterliquidappearsattheend,itisligatedtofillthebloodvessel.Theinjectionportshouldalsobeligatedtopreventliquidreflux.Digestfor3-10minutes.

4.Aspiratethedigestionsolutioncontainingendothelialcellsandpouritintoacentrifugetube.Inordertogetmorecells,injectwarmPBStorinse2or3timestocompletelyremovetheremainingcells,andthenpouritintothecentrifugetubeandcentrifuge.

5.Aspiratethesupernatant,add1640culturemediumtomakeacellsuspension,inoculateitintoaflaskanddishforculture,whenitgoeswell,thecellscangrowintoamonolayerwithin2to3days.

6) Kapillaariendoteliaalisoluviljely

Kasvainalustan valmistus:

1.S-180kiinteä sarkoomatulehdus C3H-hiiristä.

2.Trypsidigestion, 15 ml Dulbeccon muunneltua Eaglen viljelyalustaa (sisältää 10 % vasikan seerumia), siirrostettu T-75 Falcon viljelypulloihin viljelyä varten.

3.Whenthecellgrowthisclosetocompleteconfluence,theculturemediumiscollectedtomakeaconditionedmedium;afteranewmediumcontaining10%calfserumisused,itisalsocollectedeverytwodaystoobtainalargeamountofconditionedculture.

4.4000 kierroksen/sentrifugoinnin jälkeen se suodatetaan 0,22 μm mikrohuokoisen kalvon läpi ja säilytetään -20°C:ssa myöhempää käyttöä varten (sulatetaan ennen käyttöä).